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      產品中心
      D-Luciferin Firefly D-熒光素(鈉鹽/鉀鹽/游離酸)

      D-Luciferin Firefly D-熒光素(鈉鹽/鉀鹽/游離酸)

      簡要描述:

      D-Luciferin Firefly D-熒光素(鈉鹽/鉀鹽/游離酸)應用:常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測。目前市場上有三種產品形式,D-熒光素(游離酸),D-熒光素(鈉鹽),和D-熒光素(鉀鹽)。

      產品時間:2021-10-27

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      D-Luciferin Firefly D-熒光素(鈉鹽/鉀鹽/游離酸)注意事項

      1)螢火蟲熒光素(firefly luciferin)和甲蟲熒光素(beetle luciferin)皆相同化合物,即:(S)-2-(6-Hydroxy-2- benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylic acid,僅不同公司在命名上的差異。

      2)螢火蟲熒光素(firefly luciferin)在保存和操作的過程中需要避光。另,水溶性儲存液經過濾除菌后,可置于-20℃或-80℃分裝凍存,避免反復凍融。若條件允許,對儲存液充氮氣或氬氣(防止氧化),穩定性和保存時間更長,長達1年。

      3)螢火蟲熒光素(firefly luciferin)的注射方式,以及動物類型、體重等都會影響熒光信號發射,建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,確定zuijia信號平臺期和zuijia檢測時間。

      4)紫外線和潮氣會產生脫氫熒光素,是一種熒光素酶的競爭性抑制劑。因此需小心保存和處理D-熒光素。-20℃避光干燥保存。

      5)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

      D-Luciferin Firefly D-熒光素(鈉鹽/鉀鹽/游離酸)使用方法

      A.體外生物發光檢測

      1. 儲存液制備

      【注意】:建議大量實驗前先取少量原料(D-熒光素游離酸)溶于你的緩沖液,以測試其溶解性。

      【配置方法】:要溶解螢火蟲熒光素游離酸到生理鹽中,首先用NaOH或KOH調整緩沖液到預測的摩爾堿度,然后加入D-熒光素游離酸(如15mg/ml),邊攪拌邊促進溶解。如果仍有沉淀,調整pH到更高直至完全溶解。zui后用酸調整pH到所需值?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b于-80℃避光凍存,避免反復凍融。

      2. 熒光素酶反應緩沖液制備

      2.1 配方【1×,參考Yuichi Oba, et al., 2003】:100mM Tris-HCl(pH 7.8),5mM MgCl2,250µM CoA,150µM ATP。具體緩沖液組成可參考其他文獻資料來調整。按照以上配方制備熒光素酶反應緩沖液(2×)。

      3. 收集細胞裂解上清(熒光素酶表達)

      根據需要檢測的細胞類型,選擇合適的裂解液進行細胞裂解,離心收集上清后續檢測待用。

      4. 螢火蟲熒光信號檢測

      【注①】:螢火蟲熒光信號的檢測方法大體上取決于冷光測定儀(luminometer)類型(是手動型熒光計、單管注射型或者酶標板讀數型熒光計)。根據特定發光測定儀,來考慮注射用量和程序設置。

      【注②】:需設置不含熒光素酶的孔(用作陰性對照),以測定背景熒光。

      例:注射式冷光測定儀(injectible luminometer,單樣或微孔板,200µl終體積)

      a)吸取100µl熒光素酶反應緩沖液(2×)到一干凈的冷光測定儀比色皿或96孔板的各孔(使用全白平底的96孔板);

      b)吸取50~98µl裂解上清到皿或孔內;

      c)如果有需要,用水來補足使得總體積到198µl;

      d)設置程序注射2µl熒光素儲存液(使工作濃度150µg/ml),程序:2~5秒延遲(delay),之后10s測定。

       

      B.活體成像分析

      1)工作液準備:準備少量的PBS(w/o Mg2+), pH=12以及PBS(w/o Mg2+), pH=2緩沖液。先取10mg D-熒光素游離酸到165ml PBS(w/o Mg2+), pH=12,充分溶解后,再加入165ml PBS(w/o Mg2+), pH=2中和溶液,混勻得到30mg/ml的工作液。0.2µm濾膜過濾除菌?;靹蚝罅⒓词褂没蚍盅b于-80℃避光凍存,避免反復凍融。一旦使用,放到4℃解凍,保持冰冷且避光。

      2)注射方式:適用于靜脈注射,腹腔注射,肌肉注射和鼻內注射等,根據具體方式調整注射體積,zui常用的注射濃度為150mg/kg體重。

      3)檢測方式:注射入體內10-20 min(待光信號達到zui強穩定平臺期),再進行成像分析。

      【注意】:建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學曲線,從而確定zui高信號檢測時間和信號平臺期。

       

      貨號

      產品名稱

      規格

      價格(元)    

      MX4601-250MG       

      D-Luciferin Firefly, Free Acid D-螢火蟲熒光素(游離酸)   

      250mg        

      1800

      MX4601-500MG

      D-Luciferin Firefly, Free Acid D-螢火蟲熒光素(游離酸)

      500mg

      3000

      MX4601-1000MG

      D-Luciferin Firefly, Free Acid D-螢火蟲熒光素(游離酸)

      1g

      5800

       

      相關產品:更大包裝或產品技術問題,請來電/在線咨詢,: 。:www.maokangbio。。com。

      貨號

      產品名稱

      規格            

      價格(元)    

      MX4602-100MG

      D-Luciferin, Sodium Salt D-熒光素(鈉鹽)

      100mg

      998

      MX4602-500MG       

      D-Luciferin, Sodium Salt D-熒光素(鈉鹽)

      500mg

      2500

      MX4602-1G

      D-Luciferin, Sodium Salt D-熒光素(鈉鹽)

      1g

      4500

      MX4603-100MG

      D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素(鉀鹽)                 

      100mg

      998

      MX4603-500MG

      D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素(鉀鹽)

      500mg

      2500

      MX4603-1G

      D-Luciferin, Potassium Salt D-熒光素(鉀鹽)

      1g

      4500

      MX4604-10MG

      DMNPE-caged Luciferin D-熒光素(DMNPE籠閉)       

      10mg

      1350

      MX4604-50MG

      DMNPE-caged Luciferin D-熒光素(DMNPE籠閉)

      50mg

      5440

       

      注意事項

      為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

       

      D-Luciferin Firefly, Free Acid D-螢火蟲熒光素(游離酸)

       

      搜索關鍵詞:

      D-熒光素(D-Luciferin);Luc報告基因底物;螢火蟲熒光素酶Firefly luciferase;D-熒光素鉀鹽;D-熒光素鈉鹽;生物發光成像技術(Bioluminescence imaging,BLI);Luminometer熒光計;CAS NO:2591-17-5;

       

      描述:

      D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍用于整個生物技術領域,特別是體內活體成像技術。作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,D-熒光素(底物)被氧化發光。當熒光素過量時,產生的光量子數與熒光素酶的濃度呈正相關性(見下圖)。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的質粒轉染進入細胞后,導入研究動物如大小鼠體內,之后注入熒光素,通過生物發光成像技術(BLI)來檢測光強度變化,從而實時監測疾病發展狀態或藥物的治療功效等。也可以利用ATP對此反應體系的影響,根據生物發光強度的變化來指示能量或生命體征。

      這三種產品主要差別在于溶解特性。D-熒光素(游離酸)在水以及緩沖體系內的溶解性都很弱,除非溶于弱堿如NaOH和KOH溶液。溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50 mg/ml)。但鈉鹽和鉀鹽形式的D-熒光素能夠非常容易且快速的溶入水或者緩沖液中,使用方便,溶劑無毒性,特別適合體內實驗。配成溶液后的三種產品,在絕大多數應用上都沒有實質性的差別。

       

      基本特性:

      1)  CAS NO:2591-17-5

      2)  化學名:(S)-4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid; D-Luciferin Firefly, free acid D-螢火蟲熒光素游離酸,D-甲蟲熒光素游離酸;

      3)  分子式:C11H8N2O3S2

      4)  分子量:280.32 g/mol

      5)  純度:>99% (HPLC)

      6)  外觀:類白色至淺黃色粉末

      7)  溶解性:溶于甲醇(10 mg/ml)和DMSO(50mg/ml),溶于弱堿,微溶于水

      8)  化學結構圖:

       

      D-Luciferin Firefly Free Acid D-熒光素游離酸 熒光探針與細胞染色

      D-Luciferin Firefly Free Acid D-熒光素游離酸 熒光探針與細胞染色

      D-Luciferin Firefly Free Acid D-熒光素游離酸 熒光探針與細胞染色

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